Поиск по сайту

Генная диагностика в неврологии

Начиная с 90-х гг. XX в., в исследовательском арсенале клинической неврологии весомое место занимают разнообразные методы ДНК-анализа. Сейчас уже известно свыше 300 генов, повреждения которых служат причи­ной развития разных наследственных заболеваний нервной системы. К наи­более значимым заболеваниям с установленным молекулярным дефектом принадлежат семейные формы болезни Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, болезнь Альцгеймера, эпилепсия, группа прогрессирующих мышечных дистрофий, наследственные атаксии, спинальные амиотрофии, ряд наиболее часто встречающихся экстрапирамидных наследственных за­болеваний (хорея Гентингтона, торсионная дистония, болезнь Коновалова -Вильсона) и др. Знание основных принципов ДНК-диагностики является абсолютно необходимым для современного врача любой специальности, включая и практикующих неврологов.

Исходным материалом для проведения ДНК-диагностики могут быть любые ядерные клетки. Используют для этих целей, в основном, лейкоци­ты, которые выделяют из 5-20 мл периферической крови. Генодиагности­ка может проводиться также на основе исследования ДНК, выделенной из клеток эпителия полости рта, кожных фибропластов и т. п. Источником пренатальной ДНК-диагностики у плода, которая проводится обычно на 10-21-й неделе беременности, служат биоптаты хориона, плаценты, клетки амниотической жидкости или лимфоциты из сосудов пупочного канатика (кордоцентез).

Существующие методы ДНК-диагностики можно разделить на две боль­шие группы - прямую и непрямую.

Прямая ДНК-диагностика включает непосредственное выявление му­тации в исследуемом гене. Практически она является абсолютно точной, требует для анализа лишь образец ДНК обследуемого лица и может про­водиться как в семейных, так и в спорадических случаях заболеваний. Для проведения прямой ДНК-диагностики необходимо точно знать структуру соответствующего гена или конкретной его содержащей мутацию частицы, которая анализируется. Теперь большинство протоколов прямой ДНК-диагностики базируется на полимеразной цепной реакции, которая позво­ляет в течение нескольких часов получить достаточное для анализа количе­ство копий фрагмента изучаемого гена.

Непрямая ДНК-диагностика применяется при заболеваниях, ген ко­торых достаточно точно картирован, локализован в конкретном участ­ке определенной хромосомы. Важно подчеркнуть, что непрямая ДНК-диагностика может проводиться даже в тех случаях, когда любая другая информация о гене болезни (кроме его хромосомного расположения) отсутствует. Сущность непрямой ДНК-диагностики состоит в анализе наследования у больных и здоровых членов семьи полиморфных генети­ческих маркеров, расположенных в исследуемом хромосомном участке и сцепленных с геном болезни. Таким образом, становится возможным про­следить во многих поколениях наследование патологической хромосомы, которая несет мутантный ген. Вместе с тем непрямая ДНК-диагностика имеет следующие недостатки:

  • необходимы анализы ДНК нескольких членов семьи, преимуществен­но двух-трех поколений, поэтому в неинформативных семьях этот вид диа­гностики осуществить невозможно;
  • нельзя применить для диагностики спорадических случаев заболевания;
  • всегда существует вероятность ошибки, которая связана с возможной рекомбинацией в мейозе между геном заболевания и исследуемым марке­ром (частота ошибочного результата колеблется в границах 1-5 %).

Медико-генетическое консультирование. Практика проведения гене­тического консультирования на основе методов ДНК-диагностики позволя­ет решать широкий круг вопросов, затрагивающих планирование семьи и возможности деторождаемости, дальнейшего образа жизни, необходимости периодичности квалифицированного медицинского наблюдения и т. п.

В соответствии с общепринятыми международными протоколами, про­водя ДНК-диагностику неизлечимых заболеваний, необходимо придержи­ваться определенных организационно-правовых принципов:

  • добровольность обследования;
  • предоставление лицом, которое тестируется, информированного со­гласия на проведение ДНК-анализа;
  • недопустимость проведения ДНК-анализа у недееспособных лиц (даже в случае настойчивой просьбы со стороны родственников, опекунов и т. п.);
  • конфиденциальность полученной врачом информации о генетическом статусе лица, которое прошло тестирование;
  • обеспечение постоянной медико-психологической поддержки и мони­торинга в семье, которую консультируют после ознакомления ее с результа­тами ДНК-анализа.